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酸性藍(lán)黑B的合成工藝

作者:化工綜合網(wǎng)發(fā)布時(shí)間:2023-03-12分類:無機(jī)化工瀏覽:216


導(dǎo)讀:1。不行,因?yàn)樵诳s合過程中一定要有游離苯胺存在,如果不是會出現(xiàn)泛綠,所以要求縮合后,織物仍應(yīng)留有部分游離苯胺。2。加入強(qiáng)堿弱酸YAN,中和劑為醋酸鈉,中和過量HCL生成醋酸:HC...

1。不行,因?yàn)樵诳s合過程中一定要有游離苯胺存在,如果不是會出現(xiàn)泛綠,所以要求縮合后,織物仍應(yīng)留有部分游離苯胺。
2。加入強(qiáng)堿弱酸YAN,中和劑為醋酸鈉,中和過量HCL生成醋酸:HCL+CH3COONA=》NACL+CH3COOH
你的問題好像不對標(biāo)題,如果有心的話,可以把題目寫得更詳細(xì)一些!

干擾素的生產(chǎn)工藝過程

1.菌種制備
取-70℃下保存的甘油管菌種(工作種子批),于室溫下融化。然后,接入搖瓶,培養(yǎng)溫度30℃,pH7.0,250 r/min活化培養(yǎng)18±2小時(shí)后,進(jìn)行吸光值測定和發(fā)酵液雜菌檢查。
2.種子罐培養(yǎng)
將已活化的菌種接入裝有30L培養(yǎng)基的種子罐中,接種量10%,培養(yǎng)溫度30℃,pH7.0,級聯(lián)調(diào)節(jié)通氣量和攪拌轉(zhuǎn)速,控制溶解氧為30%,培養(yǎng)3~4小時(shí),轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐中,同時(shí)取樣發(fā)酵液進(jìn)行顯微鏡檢查和LB培養(yǎng)基劃線檢查,控制雜菌。
3.發(fā)酵罐培養(yǎng)
將種子液通入300L培養(yǎng)基的發(fā)酵罐中,接種量10%,培養(yǎng)溫度30℃,pH7.0。級聯(lián)調(diào)節(jié)通氣量和攪拌轉(zhuǎn)速,控制溶解氧30%,培養(yǎng)4小時(shí)。然后控制培養(yǎng)溫度20℃,pH6.0,溶解氧60%,繼續(xù)培養(yǎng)5~6.5小時(shí)。同時(shí)進(jìn)行發(fā)酵液雜菌檢查,當(dāng)OD值達(dá)9.0±1.0后,用5℃冷卻水快速降溫至15℃以下,以減緩細(xì)胞衰老。或者將發(fā)酵液轉(zhuǎn)入收集罐中,加入冰塊使溫度迅速降至10℃以下。
4.菌體收集
將已降溫的發(fā)酵液轉(zhuǎn)入連續(xù)流離心機(jī),16000 r/min離心收集。進(jìn)行干擾素含量、菌體蛋白含量、菌體干燥失重、質(zhì)粒結(jié)構(gòu)一致性、質(zhì)粒穩(wěn)定性等項(xiàng)目的檢測。菌體于-20℃冰柜中保存時(shí),不得超過12個(gè)月。每保存3個(gè)月,檢查一次活性。
11.4.3.4 干擾素發(fā)酵過程控制
在假單孢桿菌的發(fā)酵生產(chǎn)中,菌體在培養(yǎng)1.5小時(shí)分裂速度最快,到3.5小時(shí)開始下降。而干擾素的迅速合成出現(xiàn)在3.5小時(shí)之后,在4小時(shí)達(dá)到最大,然后由于降解而迅速下降。可見在發(fā)酵生產(chǎn)工藝中,假單孢桿菌的生長和干擾素的生產(chǎn)基本處于不相關(guān)狀態(tài),可采用兩段培養(yǎng)的策略進(jìn)行過程控制。
1.溶解氧控制
分別在生長階段和生產(chǎn)階段采用各自最佳溶解氧濃度,以期提高干擾素的發(fā)酵水平。通過級聯(lián)調(diào)節(jié)通氣量和攪拌轉(zhuǎn)速得以實(shí)現(xiàn)。
2.溫度控制
假單孢桿菌生長最適溫度與產(chǎn)物形成最適溫度是不同的。產(chǎn)物合成溫度控制在20℃可以有效防止干擾素-α2b的降解,而其最佳生長溫度則為30℃。質(zhì)粒的穩(wěn)定性隨溫度的升高而迅速下降,因此在培養(yǎng)后期降溫可以減少目標(biāo)產(chǎn)物的降解,增加質(zhì)粒的穩(wěn)定性。
3.pH值
發(fā)酵過程中,pH的變化由工程菌的代謝、培養(yǎng)基的組成和發(fā)酵條件所決定。干擾素-α的等電點(diǎn)在pH 6.0附近,在低酸性條件下穩(wěn)定,能耐受pH 2.5的酸性環(huán)境。因此可在發(fā)酵后期降低pH,從而造成大量蛋白酶失活,減少干擾素-α的水解,提高干擾素的積累量。

標(biāo)簽:干擾素過程工藝


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