陰離子表面活性劑 英文化學(xué)術(shù)語: An-ionic surfactant. 表面活性劑的一類。在水中解離后，生成憎水性陰離子。如脂肪醇硫酸鈉在水分子的包圍下，即解離為ROSO2-O-和Na+兩部分，帶負(fù)電荷的ROSO2-O-，具有表面活性。 陰離子表面活性劑分為羧酸鹽、硫酸酯鹽、磺酸鹽和磷酸酯鹽四大類，具有較好的去污、發(fā)泡、分散、乳化、潤濕等特性。廣泛用作洗滌劑、起泡劑、潤濕劑、乳化劑和分散劑。產(chǎn)量占表面活性劑的首位。不可與陽離子表面活性劑一同使用，在水溶液中生成沉淀而失去效力。
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多糖定性與定量的設(shè)計實驗

鑒定多糖（參考資料）：
1.苯酚-硫酸法 需要多糖的純品和特定的酶
2.蒽酮-硫酸法 多糖在濃硫酸水合產(chǎn)生的高溫下迅速水解，產(chǎn)生單糖，單糖在強酸條件下與苯酚反應(yīng)生成橙色衍生物。在波長490nm左右處和一定濃度范圍內(nèi)，該衍生物的吸收值與單糖濃度呈線性關(guān)系，從而可用比色法測定其含量，所用的單糖對照品盡量采用與其多糖組成一致或為含量較高的單糖，這樣測得的值較準(zhǔn)確。
3.3，5-二硝基水楊酸比色法（DNS法） 在堿性條件下顯色，較準(zhǔn)確測定還原糖與總糖的含量從而求出多糖的含量，可消除還原性雜質(zhì)的干擾。

多糖的分離純化
在多糖提取物中，常會有無機鹽、蛋白質(zhì)、色素及小分子物質(zhì)等雜質(zhì)，必須分別除去．一般是先脫除非多糖組分，再對多糖組分進行分級．
2．1 除蛋白：除蛋白質(zhì)時一般選擇能使蛋白質(zhì)沉淀而不使多糖沉淀的試劑來處理，如酚、三氯乙酸、鞣酸等。但必須處理時間短，溫度低，避免多糖降解。Sevage法（氯仿：戊醇/丁醇=4：1）和三氟三氯乙烷法在避免降解上有較好效果但要達到除盡游離蛋白質(zhì)的目的仍需反復(fù)處理。如能加入蛋白質(zhì)水解酶，使蛋白質(zhì)大分子進行一定程度的降解，再用Sevage法處理，一般效果更好。
為了避免使用有機溶劑也可采用反復(fù)凍融的方法除蛋白，將多糖液濃縮后，一20℃室溫反復(fù)凍融7～8次，離心除去蛋白質(zhì)。另外，蛋白質(zhì)在等電點時溶解度最小，用氫氧化鈣飽和液調(diào)pH10～pH11可除去偏堿性的蛋白質(zhì)，然后再用硫酸調(diào)pH5～pH6，可除去偏酸性的蛋白質(zhì)。凍融和等電點沉淀除蛋白質(zhì)操作簡單，但多糖液里往往有低濃度的蛋白質(zhì)殘留，應(yīng)與其它方法結(jié)合使用。
2．2 脫色：植物多糖提取物中含有酚類化合物而使其顏色較深，可用吸附劑(纖維素、硅藻土、活性炭等)、離子交換柱(DEAE一纖維素)、氧化劑(H2O2)等脫除?；钚蕴勘缺砻娣e大，吸附能力強，在進行當(dāng)歸多糖的提取時只向多糖液中加入了0．1％左右的活性炭，煮沸后濾過即完成了脫色操作。此法成本低廉，適合工業(yè)化生產(chǎn)。
2．3 除小分子雜質(zhì)
小分子雜質(zhì)如低聚寡糖的殘留往往影響多糖的生物活性，需要進一步脫除，提高純度。傳統(tǒng)的方法是透析法，該法操作簡單、技術(shù)成熟，但周期長，往往需要2一3天，常溫下操作有可能造成多糖的霉變，必要時需加入少量防腐劑或需在低溫條件下進行。隨著膜分離技術(shù)的發(fā)展，纖維濾器透析法已經(jīng)發(fā)展起來了，它利用不同孔徑的膜使大小不同的分子分級，這種方式可縮短生產(chǎn)周期，而且條件溫和，無疑是多糖脫除雜質(zhì)的一條新途徑。
2．4 多糖的分級純化
采用一般方法提取的多糖通常是多糖的混合物，分級的方法可達到純化的目的．可按溶解性不同進行分級、按分子大小和形狀分級(如分級沉淀、超濾、分子篩、層析等)，也可按分子所帶基團的性質(zhì)分級．
2．4．1按溶解性不同分離
2.4.1.1分步沉淀法
分步沉淀法是根據(jù)不同多糖在不同濃度低級醇、酮中具有不同溶解度的性質(zhì)，從小到大按比例加入甲醇或乙醇或丙酮進行分步沉淀．
2.4.1.2 鹽析法
鹽析法是根據(jù)不同多糖在不同鹽濃度中溶解度不同而將其分離的一種方法。常用的鹽析劑有氯化鈉、氯化鉀、硫酸銨等，其中以硫酸銨最佳。
2.4.2 按電離性質(zhì)不同分離
2.4.2.1季胺鹽沉淀法
季胺氫氧化物是一類乳化劑，能與酸性多糖形成不溶性化合物季銨絡(luò)合物，此絡(luò)合物在低離子強度的水溶液中不溶解而產(chǎn)生沉淀。若提高多糖液pH值或加入硼砂緩沖液，也可使中性多糖沉淀分離。常用季銨鹽有十六烷基三甲基季銨鹽的溴化物及其氫氧化物和十六烷基吡啶。
2．4．3 柱層析法
2.4.3.1凝膠柱層析法
凝膠柱層析法常用的凝膠有葡聚糖凝膠(Sephadex)和瓊脂糖凝膠(Sepharose)，以不同濃度的鹽溶液和緩沖溶液作為洗脫劑，從而使不同大小的多糖分子得到分離純化，但不適宜粘多糖的分離。
2.4.3.2纖維素陰離子交換劑柱層析法
纖維素陰離子交換劑柱層析法常用的交換劑為DEAE一纖維素和ECTEOLA一纖維素，分類硼砂型和堿型兩種，洗脫劑可用不同濃度堿溶液、硼砂溶液、鹽溶液，其優(yōu)點可吸附雜質(zhì)、純化多糖，并適用于分離各種酸性、中性多糖和粘多糖。如百合多糖、北沙參多糖、太子參多糖等。
2.4.3.3 活性炭柱層析法
活性炭吸附量大、效率高，是分離水溶性物質(zhì)的常用吸附劑。柱層析時活性炭中常拌入等量的硅藻土作稀釋劑，以增加溶液的流速。糖溶液上柱后先用水洗脫無機鹽、單糖等再依次增加乙醇濃度進行洗脫。
2.4.3.4 離子交換柱層析和普通凝膠柱層析聯(lián)用法
有些植物的多糖成分復(fù)雜， 除中性多糖外，還含有糖醛酸等，因此往往兩種不同性質(zhì)的色譜柱聯(lián)用才能得到單一多糖組分。
2.4.3.5 三種層析柱聯(lián)用
采用離子交換葡聚糖凝膠柱、丙烯葡聚糖凝膠柱和葡聚糖凝膠柱三者聯(lián)用，即先進行DEAE—SephadexA柱層析，用蒸餾水洗脫。水洗組分進一步用SephacrylS柱層析，得到主要組分再用SephadexG一100柱層析，有時會有較高的得率。
三、多糖的純度鑒定
經(jīng)過分級純化的多糖在測定結(jié)構(gòu)前須進行純度鑒定．而且多糖的純度不能用通?；衔锏募兌葮?biāo)準(zhǔn)來衡量，因為即便是多糖純品，其微觀也并不均一，僅代表相似鏈長的多糖分子的平均分布，通常所謂的多糖純品也只是一定相對分子質(zhì)量范圍的多糖的均一組分．目前常用于多糖純度的鑒定方法有：高效液相、 凝膠層析法、電泳法、色譜法、旋光度法等．

多糖的單糖組分的鑒定稱取多糖粗品8 mg，用2 mL濃度為1 mol／L硫酸100*C水解6 h。飽和Ba(OH)2中和至中性，抽濾，取濾液，濃縮，毛細(xì)管點樣，薄層層析法分析。采用硅膠G板105(2活化2 h后使用。標(biāo)準(zhǔn)糖分別為D一半乳糖，D一葡萄糖，D一甘露糖，L一山梨糖、L一阿拉伯糖。展開劑為正丁醇一冰醋酸一水(4：1：5)(體積比)。用AgNO3一NaOH 溶液顯色。

標(biāo)簽：多糖定性定量